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2013-04-24
ELISA試劑臨床考核血清盤的制備要求大鼠ELISA試劑盒的評價（evaluation）分兩個方面：一是試劑本身的質量評價，符合一定要求后才能生產(chǎn)供應；一是在臨床應用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過中國藥品生物制品檢定，以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標簽、說明書等外，對試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定，通過對一系列參比品的檢測，結果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質量評價是用該試劑對臨床樣本進行檢測，以觀察其實際應用...2013-04-17
單克隆抗體的克隆化方法經(jīng)過抗體測定的陽性孔，可以擴大培養(yǎng)，進行克隆，以得到單個細胞的后代分泌單克隆抗體。克隆的時間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長，互相爭奪營養(yǎng)和空間，而產(chǎn)生抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早，太早細胞性狀不穩(wěn)定，數(shù)量少也易丟失。克隆化的陽性雜交瘤細胞，經(jīng)過一段時期培養(yǎng)之后，也還會因為細胞突變或特定染色體的丟失，使部分細胞喪失產(chǎn)生抗體的能力，所以需要再次或多次克隆化培養(yǎng)。克隆化次數(shù)的多少由分泌能力強弱和抗原的免疫性強...2013-04-15
轉移因子生化應用性能①轉移因子能夠將供體的某一些特異性和非特異性細胞免疫功能，轉移給受體，擴大受體的免疫反應。②轉移因子有觸發(fā)和調節(jié)細胞免疫功能，使未接觸過抗原的細胞致敏，T淋巴細胞分化增殖為效應T細胞，發(fā)生增效反映，變成致敏淋巴細胞和釋放具有免疫活性的淋巴因子，攻擊體內(nèi)病毒等外來物。③活化巨噬細胞，增強協(xié)同參與免疫反應的巨噬細胞識別、結合、吞噬和消化抗原的能力。④轉移因子還能提高體內(nèi)白介素II、干擾素等人多種細胞因子在體內(nèi)的，調整多項免疫指標、作用于免疫系統(tǒng)的多個環(huán)節(jié)、糾正...2013-04-12
技術指導ELISA試劑盒包被方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被（coating）。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結多發(fā)生...2013-04-09
ELISA試劑盒酶標記抗體的制備酶標記抗體的制備方法主要有兩種，即戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。（1）戊二醛交聯(lián)法：戊二醛是一種雙功能團試劑，它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯(lián)結。堿性磷酸一般用此法進行標記。交聯(lián)方法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接加入酶與抗體的混合物中，反應后即得酶標記抗體。ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡便、有效（結合率達60%-70%）和重復性好等優(yōu)點。缺點是交聯(lián)反應是隨機的，酶與抗體交聯(lián)時分子間的比例不嚴格，結合物的大小也不均...2013-04-01
簡述成人胰腺消化、胰島分離方法：尸體胰腺原位灌洗后置UW液中，4℃保存運輸。到實驗室后在4℃Euro-Collins液中清除非胰組織，從胰管內(nèi)插入穿刺針，絲線縫扎后用注射器灌注Liberase酶溶液（1.5mg/ml）。胰腺充分膨脹后將胰腺切片，置消化罐中并放入數(shù)顆玻璃珠，加500μm孔徑的不銹鋼絲網(wǎng)，旋緊罐蓋。開啟蠕動泵將剩余的Liberase酶溶液泵入罐內(nèi)，控制罐內(nèi)溫度37℃，手動振搖消化罐循環(huán)消化，于10分鐘后開始取樣鏡檢，待大部分胰島分離后用冷的含10%胎牛血清（FB...