一、方法學(xué)缺陷：競爭抑制法成重災(zāi)區(qū)

操作時差效應(yīng)：競爭抑制法(HBeAb/HBcAb檢測常用)易因加樣時間差異導(dǎo)致不-公平競爭，重復(fù)性差

質(zhì)量控制難點：相較于雙抗體夾心法等，該模式對溫育時間敏感度更高

二、試劑因素：批間差異與保存條件

生產(chǎn)波動：不同批次間活性成分濃度存在天然差異，建議選擇長批號試劑

儲存不當(dāng)：2-8℃避光保存為基本要求，反復(fù)凍融會破壞酶標(biāo)記物活性（尤其HRP標(biāo)記抗體）

分裝技巧：使用率低的試劑應(yīng)分裝保存，避免整盒反復(fù)凍融

三、樣本污染：隱形殺手清單

干擾類型具體表現(xiàn)內(nèi)源性類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體等造成假陽性外源性溶血、細(xì)菌污染、反復(fù)凍融標(biāo)本導(dǎo)致蛋白降解

四、操作失誤：細(xì)節(jié)決定成敗

加樣誤差：未更換吸頭導(dǎo)致交叉污染

溫育失控：溫度波動超過±1℃顯著影響抗原抗體結(jié)合

洗滌不徹-底：殘留物質(zhì)干擾顯色反應(yīng)

五、環(huán)境因素：容易被忽視的威脅

光照破壞：底物B對光敏感，需避光操作

化學(xué)污染：實驗臺面消毒劑殘留可能抑制酶活性

揮發(fā)損失：開蓋時間過長導(dǎo)致液體試劑濃度改變

六、過期失效：時間成本不可逆

活性衰減：超過有效期后抗體效價急劇下降

標(biāo)準(zhǔn)品失效：稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品禁止二次使用

實用解決方案

采用真空采血管避免溶血

每板設(shè)置復(fù)孔提高數(shù)據(jù)可靠性

建立試劑驗收記錄表追蹤批號性能

溫馨提示：定期校準(zhǔn)移液器，建議每季度進(jìn)行1次重力校準(zhǔn)（特別是微量移液器）