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氨基酸脫羧酶試驗基礎(chǔ)培養(yǎng)基的使用方法以及注意事項

日期:2014-01-01瀏覽:1705次

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使用方法:
1、 稱取本品9g,加入蒸餾水或去離子水或去離子水1 L,分別加入5g L-氨基酸或10g DL-氨基酸(賴氨酸、精氨酸或鳥氨酸),攪拌加熱煮沸至*溶解后再校正pH。對照培養(yǎng)基不加氨基酸。分裝試管,每管2.5mL,液面復(fù)蓋約3mm高度液體石蠟。
2、 115℃高壓滅菌10min,待冷卻后備用。
3、 取待檢菌的新鮮純培養(yǎng)物,分別接種在含有各種氨基酸的培養(yǎng)基內(nèi)(仔細(xì)地通過培養(yǎng)基內(nèi)的液體石臘層接種在培養(yǎng)基內(nèi))和不含氨基酸的對照管內(nèi),置36±1℃培養(yǎng)18—24h后作初次觀察,必要時可延長至48h。
4、 氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿,培養(yǎng)基呈紫色。陰性者無堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對照管應(yīng)為黃色。

質(zhì)量控制:以下菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18—24h,結(jié)果公布:


注意事項:
1、經(jīng)培養(yǎng)后對照管必須為黃色,否則氨基酸脫羧酶試驗無效。
2、有時培養(yǎng)時間過長指示劑被破壞,顏色可能不清楚或消失,可在試管內(nèi)再加溴甲酚紫來證實。
3、接種前須將各種培養(yǎng)基及對照管做好標(biāo)記,以免混淆,造成錯誤判斷。
4、判斷結(jié)果時,應(yīng)與未接種的培養(yǎng)基進行比較,試驗管出現(xiàn)任何紫色的痕跡都可判定為陽性結(jié)果,培養(yǎng)時間一般不應(yīng)超過4d,若時間過長,蛋白胨中其他氨基酸可被分解產(chǎn)堿,出現(xiàn)假陽性。

    以上是氨基酸脫羧酶試驗基礎(chǔ)培養(yǎng)基的使用方法以及注意事項,我公司專業(yè)代理elisa試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品、抗體、培養(yǎng)基、生化試劑等等,質(zhì)量保證。

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